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其次，研究者利用光遗传学结合GRAB-5HT传感器证实，胆碱能中间神经元（CINs）的同步激活足以独立驱动背侧纹状体内的5-HT释放。这一过程由α4β2型烟碱型乙酰胆碱受体（nAChRs）直接介导，且乙酰胆碱直接作用于5-HT神经纤维，无需经过GABA、谷氨酸或多巴胺系统的中转。
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第三，实验进一步发现，这种由CINs触发的5-HT释放仅存在于背侧纹状体，而在腹侧纹状体中并未检测到，暗示CINs可能是背侧区域内调控5-HT释放的唯一内源性乙酰胆碱来源。
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最后，进一步利用光遗传技术激活VTA的多巴胺神经元后，ACC中的多巴胺水平迅速上升，说明该通路不仅结构上相连，还能功能性地调控前扣带皮层的活动。这为理解多巴胺系统如何参与社交观察学习提供了重要神经环路基础。
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